第七章 肠杆菌科

  1.目的要求

  掌握肠杆菌科中常见的致病菌的：

  1染色特性及培养特性

  2抗原结构及血清型

  3致病性微生物学诊断及防治方法

  肠杆菌科中主要致病菌：

  （1）大肠杆菌

  （2）沙门氏菌

  如：提到沙门氏菌，第一印象：大多数是致病菌。

  2.概述

  1肠道杆菌的分布广

  2大多数肠道杆菌是肠道的常居菌，也是条件致病菌

  3有些细菌为致病菌，如：

  沙门菌属

  志贺菌属

  耶尔森属

  埃希菌属

  耶尔森属、埃希菌属部分细菌引起人类和动物肠道疾病，在公共不卫生和兽医学上具有重要意义。

  3.肠道杆菌具有下述共同特征

  3.1 形态与结构

  中小等大小两端钝圆的 G- 杆菌，无芽孢，多数有鞭毛，大多有菌毛，少数有荚膜或包膜；难以通过形态学观察区分不同种属成员间的差别。

  3.2 培养特性与生化反应

  1需氧或兼性厌氧，在普通培养基上生长良好，为中等大小光滑型菌落。

  有些菌在血琼平板上出现β型溶血，在液体培养基中呈均匀混浊生长。

  2生化反应活泼，但可形成不同的代谢产物，常用于鉴别。乳糖发酵试验可初步鉴别肠道致病菌和非致病菌，前者一般不分解乳糖，非致病菌多数能分解。

  3.3 抵抗力

  不强，加热 60c经 30min 立即死亡。胆盐、煌绿染料等对大肠杆菌等非致病菌有选择性作用，可制备肠道杆菌选择性培养基以分离肠道致病菌。

  3.4 变异

  易出现变异菌株。最常见的是耐药性转移、毒素产生和生化反应。

  等的改变这在致病力、细菌学诊断、治疗与预防中均有重要意义。

  3.5 致病物质

  内毒素是肠道杆菌的主要致病物质。部分肠杆菌产生外毒素致病。

  3.6 传播方式

  通过污染的饮水及食物，经消化道传播。

  第一节 埃希菌属

  概述

  本属有 8 个种：大肠埃希菌、螳螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌等。

  其中最重要的种是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，下分血清型。

  本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。

  大肠杆菌在环境卫生和食品卫生学上常用作粪便直接或间接污染检测指标。

  本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象。

  大肠杆菌

  1.生物学性状

  1形态及染色特性

  2培养特性

  3生化特性

  4抗原及血清型

  5抵抗力

  （1）形态及染色特性

  1G- 菌无芽孢的直杆菌，大小 0.4—0.7x2—3um，两端钝圆，散在或成对碱性染料对本菌有良好着色性，菌体两端偶尔略深染。

  2鞭毛。大多数菌株以周生鞭毛运动。

  3菌毛。一般均有 1 型菌毛，少数菌株兼具性菌毛，多数对人和动物致病菌株还常有与毒力相关的特殊菌毛。

  4荚膜。除少数菌株外，通常无可见荚膜，但常有微荚膜。

  2）培养特征

  1呼吸类型：本菌为兼性厌氧菌

  2营养条件：在普通培养基上生长良好

  3生长温度：最适生长温度为 37c

  4 酸碱度 ：最适生长 ph 为 7.2—7.4

  5生长现象

  培养基 生长

  在肉汤中 S 型菌株呈均匀混浊，管底有

  粘性沉淀，液面管壁有菌环

  在营养琼脂上 形成圆形凸起，光滑，湿润，半透

  明，灰白色菌落，直径约 2—3mm

  麦康凯琼脂 形成红色菌落

  伊红美蓝琼脂(重要） 产生黑色带金属闪光的菌落

  绵羊血平板 一些致病性菌株呈β溶血

  沙门氏菌无色

  （3）生化特性

  1能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸产气

  2大多数菌株可迅速发酵乳糖

  3大肠杆菌 ImVic 试验呈“+ +－－” 沙门氏菌“－ + － + ”

  吲哚（I） 甲基红（m） Vp（Vi） 枸橼酸盐利用（c）四种试验

  常用于鉴定肠道杆菌，合称之为 ImVic 试验。

  （4）抗原及血清型

  大肠杆菌抗原主要有 o、K 和 h 三种，它们是本菌血清型鉴定的物质基础。有人认为自然界中可能存在的大肠杆菌血清型可高达数万种，但致病性大肠杆菌的血清型数量是有限的。

  o 抗原

  1为脂多糖，S 型菌的一种耐热菌体抗原，已确定大肠杆菌 o 抗原 173 种。

  2抗原特性决定于 LpS 的特异多糖侧链的结构。

  3当 S 型菌体丢失该部分结构时，即变成 R 型菌，o 抗原也随之丢失。这种菌株无法作分型鉴定。

  4每个菌株只含有一种 o 抗原，其种类以阿拉伯数字表示。

  可用单因子抗 o 血清做玻璃板或试管凝集试验鉴定之。

  （沙门氏菌：一对多）

  K 抗原

  1菌体表面的一种热不稳定抗原，多存在于荚膜中个别位于菌毛中，又称为表面抗原或 Vi 抗原。

  2具有 K 抗原的菌株不会被其相应的 o 血清凝集，称为 o 不凝集性。

  3在 80 种 K 抗原中，除 K88 和 K99 是两种蛋白质 K 抗原外，其余均属多糖 K 抗原。

  4根据耐热性不同，K 抗原又分成 L、A 和 b 三型，其中 L、b 不耐热。一个菌落可含 1~2 种不同 K 抗原，也有无 K 抗原的菌株。

  h 抗原

  1是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原，有 56 种。加热至 80c或经乙醇处理后即可破坏其抗原性。

  2每一有动力的菌株仅含有一种 h 抗原。无鞭毛菌株或丢失鞭毛的变种则不含 h 抗原。

  3h 抗原能刺激机体产生高效价凝集抗体。

  大肠杆菌血清型表示法：

  1根据对大肠杆菌抗原的鉴定，可用 o：K：h 排列表示其血清型。

  2如 o8：K23（L）：h19，即表示该菌具有o 抗原 8，L 型 K 抗原 23，h 抗原为 19。

  3对致人畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌（EtEc），除含酸性多糖 K 抗原外，还含有蛋白质性黏附素抗原。这类菌株黏附素抗原应并列写于酸性多糖 K 抗原之后。如 o8：K87，K88:h19中 K88即为黏附素抗原 F4。

  抵抗力

  1对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55c经60min 或 60c加热 15min 仍有部分细菌存活。

  2在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。

  3胆盐、煌绿染料等对大肠杆菌有抑制作用。

  4对磺胺类，链霉素，氯霉素等敏感，但易耐药，是由带有 R 因子的质粒转移而获得的。

  2.大肠杆菌致病性

  1大部分为条件致病菌

  2少数为病原性大肠杆菌

  3根据毒力因子与发病机理的不同分为：

  （1）肠道致病性大肠杆菌

  （2）肠道外致病性大肠杆菌

  2.1 肠道致病性大肠杆菌

  产肠毒素大肠杆菌（EtEc）

  肠致病型大肠杆菌（EpEc） 产志贺毒素大肠杆菌（StEc）

  肠出血型大肠杆菌（EhEc）

  肠聚集型大肠杆菌（EAEc）（导致炎症性腹泻）

  肠侵袭型大肠杆菌（EIEc）（导致炎症性腹泻）

  弥散黏附型大肠杆菌（dAEc）

  2.2 肠道外致病性大肠杆菌

  1败血性大肠杆菌（SEpEc）

  2尿道致病性大肠杆菌（UpEc）

  3禽致病性大肠杆菌（ApEc）