第八章 巴氏杆菌科及黄杆菌科

  目的要求：要求掌握巴氏杆菌科及相关属中致病性巴氏杆菌，放线杆菌，嗜血杆菌，里氏杆菌形态及染色特性，致病性，微生物学诊断方法及预防治疗方法。

  第一节 巴氏杆菌属

  本属细菌已报道有 20 多种，其中多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌。

  多杀性巴氏杆菌

  1本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病的病原体，也可感染人。主要使动物发生出血性败血症或传染性肺炎。

  2有三个亚种：

  （1）多杀亚种

  （2）败血亚种

  （3）杀禽亚种

  3过去实际工作中曾按感染动物名称命名，如猪巴氏杆菌，现统称为多杀性巴氏杆菌。

  补：数字化管理→数据异常→立即采取措施

  保温不当→细菌感染→病毒感染

  4本菌广泛分布于世界各地，正常存在于多种健康动物口腔和咽部黏膜，当动物处于应激状态，机体抵抗力低下时，细菌侵入体内，大量繁殖并致病。

  5在同种或不同动物间可相互传染，蜱和蚤被认为是自然传播的媒介昆虫。

  1.生物学性状

  形态及染色

  培养及生化特性

  血清型

  抵抗力

  1.1 形态及染色：

  1两端钝圆，中央微凸的短杆状菌，大小为0.25-0.4umx0.5-2.5um，单个存在，有时成双排列。

  2病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时可见典型的两极着色，革兰阴性菌。

  3无鞭毛，不形成芽孢。新分离的强毒菌株有荚膜。

  1.2 培养及生化特性：

  1呼吸类型：需氧或兼性厌氧菌

  2营养条件：对营养要求较高

  （1）普通培养基上生长贫瘠

  （2）麦康凯培养基上不生长

  （3）加有血液、血清或微量血红素培养基上生长良好

  3最适温度：为 37c

  4 最适 ph：7.2-7.4

  1.3 生长形态：

  1在血清琼脂平板上培养 24h，可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。

  2在血琼脂平板上，长成水滴样小菌落，无溶血现象 （对比放线杆菌）

  →血清琼脂与血琼脂不一样

  3在血清肉汤中培养，开始轻度浑浊，4-6d 后液体变清朗，管底出现黏稠沉淀，震摇后不分散。表面形成菌环。

  1.4 生化特性：

  1培养 48h 可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖产酸不产气。大多数菌株可发酵甘露醇、山梨醇和木糖。

  2一般对乳糖、鼠李糖、水杨苷、肌醇、菊糖、侧金盏花醇不发酵。

  3可形成靛基质。触酶和氧化酶试验均为阳性，产生硫化氢和氨。

  4甲基红试验和 Vp 试验均为阴性，石蕊牛乳无变化，不液化明胶。

  1.5 血清型 ：

  1菌体（o 抗原）:以菌体抗原作凝集反应，将本菌分为 16 个血清型，以阿拉伯数字表述。

  2荚膜（K 抗原）：以特异性荚膜抗原吸附于红细胞上作被动血凝，可分6 个血清型，用大写字母表示：A、b、c、d、E、F。

  3菌血清型表示方法

  o 抗原：K 抗原→如 5：A

  4我国常见畜禽多杀性巴氏杆菌的血清型。

  （1）禽源多杀性巴氏杆菌以 5：A 为多，其次为 8：A。

  （2）猪源的以 5：A 和 6：b 为主，其次 8：A 与 2：d。

  （3）羊源的以 6：b 为多。

  （4）家兔源的以 7：A 为主，其次是 5：A。

  （5）c 型菌时犬、猪的正常栖居菌。

  （6）F 型主要发现于火鸡，致病作用均不清楚。

  本菌从发病动物体液或组织中培养分离到的菌落，经 45o折光在低倍显微镜下，根据菌落有无荧光及荧光色彩可分为三个型：

  蓝色荧光型（Fg）：菌落呈现鲜明的蓝绿色而带金光，边缘有狭窄的红黄色带，相当于血清型 b 型，对家兔和猪毒力强大而对禽类毒力较弱。

  橘红色荧光型（Fo）：菌落呈现橘红色，边缘稍带狭窄黄绿光。

  相当于血清型 A 型，对禽类毒力强大对畜类较弱，家兔对两型致死量无甚差异。

  无荧光型（Nf）：对畜禽的毒力都较弱。

  1.6 抵抗力：

  1本菌抵抗力不强。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡阳光中暴晒 10min 或 56c，15min 或 60c，10min 可被杀死。

  2保存：本菌接种马丁肉汤或其平板，生长后置 4c保存，每半月应移植一次。冻干菌种在低温中可保存长 26 年

  →对此菌没做任何处理?不像肠道杆菌半年拿出来还有活力

  2.致病性

  1本菌是多种动物的重要病原菌。对家禽、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都可致病。

  急性型：呈出血性败血症迅速死亡。

  亚急性型：于粘膜、关节等部位，发生出血性炎症等。

  慢性型：呈现萎缩性鼻炎（猪、羊）、关节炎及局部化脓性炎症等。

  补：母牛没生完小牛不产奶，用激素→成本高+泌乳量低

  掌握正常动物器官颜色、形状→对比→判断是否患病

  每个厂都有呼吸系统问题

  猪萎缩性鼻炎 AR :

  （1）大多数情况下，AR 是 d 血清型中能产生一种耐热外毒素的 p . multocidin（多杀素）与波氏杆菌混合感染所致，前者起主导作用。

  （2）该耐热外毒素，可致豚鼠皮肤坏死及小鼠死亡。

  用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎。

  2实验动物中小鼠极易感染，鸽对杀禽亚种的易感性强。

  猪肺疫→咳嗽、呼吸急促

  1.毒力因子

  1荚膜（透明质酸）—抗吞噬作用

  2内毒素（杀禽亚种的致病力有关）

  含氮的磷酸脂多糖，引致禽霍乱，表现出血性败血症状。

  34 型菌毛（黏附作用）

  4铁载体（多杀素）

  5耐热外毒素（d 血清型的一些菌株），如 AR 的致菌株。

  2.显微镜检查

  1采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料图片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色，显微镜检查，如发现典型的两极着色的短杆菌，结合流行病学及剖检，即可作初步诊断。

  考：养殖场发生疑似猪种病例，请你拟出微生物诊断过程

  2革兰染色为阴性球杆菌。

  3注意：慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体，须进行培养和动物试验。

  4.动物试验

  1用病料研磨制成悬液，或用分离培养菌，皮下注射小鼠，家兔或鸽子，动物多在 24~48h 内死亡。

  →强调分离纯化后需接种

  2由于健康动物呼吸道内常可带菌，所以应参照患畜生前临床症状和剖检变化，结合分离菌株的独立试验，作出最后诊断。

  5.血清型鉴定

  1若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型，则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。

  2检测动物血清中的抗体，可用试管凝集、间接凝集、琼脂扩散试验或 ELISA。